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細胞炎性蛋白2Elisa試劑盒實驗的準備和反應步驟

點擊次數(shù):727次 更新時間:2020-09-17

  細胞炎性蛋白2Elisa試劑盒實驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。
  細胞炎性蛋白2Elisa試劑盒的準備:
  1、使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫,試劑不能直接在37oC溶解。
  2、標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,依次倍比稀釋成不同的梯度,標準品稀釋液直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
  3、濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
  細胞炎性蛋白2Elisa試劑盒反應步驟:
 ?。?)嚴格按照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
 ?。?)加樣后及時放人孵箱。標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。
 ?。?)封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導致“花板"的出現(xiàn)。
 ?。?)用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,ELISA試劑盒這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導致“花板"的出現(xiàn)。
 ?。?)合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
 ?。?)加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
 ?。?)顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
 ?。?)加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
  (9)應保證酶標板清潔,整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至低限度。ELISA試劑盒豚鼠從而提高檢測的特異性。并得到更準確、可靠的實驗結(jié)果。
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