綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
產(chǎn)堿普羅威登斯菌規(guī)格 | Providenci | EY-J964022 |
資源名稱: 產(chǎn)堿普羅威登斯菌
種屬: Providencia alcalifaciens
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: yes
應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株
培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
生長(zhǎng)條件: 37℃,好氧
存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱為四級(jí)發(fā)酵。
環(huán)指蛋白213英文全稱Sucrose synthase英文簡(jiǎn)稱SS 檢測(cè)范圍:8148nmol/L-32ng/mL
環(huán)指蛋白211抗體英文全稱white spot syndrome virus英文簡(jiǎn)稱WSV 檢測(cè)范圍:8141nmol/L-
環(huán)指蛋白210抗體英文全稱whitespotsyndromevirus VP28英文簡(jiǎn)稱WSSVVP28 檢測(cè)范圍:8143nmol/L-
環(huán)指蛋白1抗體英文全稱adenylate deaminase英文簡(jiǎn)稱ADA 檢測(cè)范圍:8267nmol/L-40U/L
環(huán)指蛋白19抗體英文全稱FVT1英文簡(jiǎn)稱FVT1 檢測(cè)范圍:3094nmol/L-10ng/mL
環(huán)指蛋白19B抗體英文全稱aryl hydrocarbon hydroxylase英文簡(jiǎn)稱AHH 檢測(cè)范圍:8126nmol/L-3000pg/ml
環(huán)指蛋白190抗體英文全稱MC-LR英文簡(jiǎn)稱MC-LR 檢測(cè)范圍:8137nmol/L-12μg/mL
環(huán)指蛋白189抗體英文全稱pituitary adenylate cyclase activating polypeptide英文簡(jiǎn)稱PACAP 檢測(cè)范圍:8190nmol/L-16ng/mL
L-ABRINE 規(guī)格:供鑒別用 組織相容性復(fù)合體β抗體
PhysalinL 規(guī)格:供鑒別用 Myc基因肺癌相關(guān)蛋白抗體
1-METHYLHYDANTOIN 規(guī)格:供鑒別用 結(jié)腸癌相關(guān)蛋白MIC1抗體
Columbin 規(guī)格:供含量測(cè)定用 甲基丙二尿癥cblA抗體
Anwuligan 規(guī)格:鑒別 DNA修復(fù)甲基磺敏感性基因19抗體
tracheloside 規(guī)格:含量測(cè)定 非平滑肌肌球蛋白2A抗體
chikusetsusaponinIva 規(guī)格:供含量測(cè)定用 19號(hào)染色體開放閱讀框28抗體
3'-Hydroxy-3,4,4',5-tetraMethoxybibenzyl 規(guī)格:供含量測(cè)定用 T淋巴細(xì)胞成熟相關(guān)蛋白抗體
dendrophenol 規(guī)格:鑒別 p53激活蛋白2抗體
粘蛋白/粘液素1(MUC1)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: MUC1 ELISA Kit
β血板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit 96T/48T
白介素6(IL-6)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat Ierleukin 6,IL-6 ELISA KIT
CLIAKitfoGF-Beta1(MouseansformingGrowthfactorBeta1)ELISAkit轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1規(guī)格:48T/96T
全組織乙酰膽脂酶活性染色試劑盒10次
ELISAKiANA抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體規(guī)格:48T/96T
25-羥基3(25OH Vitamin D3)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊脂蛋白脂酶(LPL)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat Lipoprotein Lipase,LPL ELISA Kit
尿微量白蛋白(MAU)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: MAU ELISA Kit
RabbitSerumamyloidA,SAA酶聯(lián)免疫試劑盒兔血清淀樣蛋白A(SAA)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanbasicfetoprotein,BFP酶聯(lián)免疫試劑盒性胎兒蛋白(BFP)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanCreatineKinaseMBisoenzyme,CK-MBELISAKit肌激酶同工酶MB(CK-MB)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
產(chǎn)堿普羅威登斯菌規(guī)格中心體和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體1-基硅烷-1-己炔Porcine PAR1 (Protease Activated Receptor 1) ELISA Kit
9號(hào)染色體開放閱讀框153抗體十一烯酰Porcine rT3 (Reverse Triiodothyronine) ELISA Kit
4號(hào)染色體開放閱讀框19抗體十一烯酰Porcine PTPRN (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type N) ELISA Kit
4號(hào)染色體開放閱讀框27抗體銅Porcine C5 (Complement Component 5) ELISA Kit
4號(hào)染色體開放閱讀框22抗體1,5-環(huán)辛二烯雙(甲基聯(lián)苯基)銥(I)六磷鹽Porcine PON1 (Paraoxonase 1) ELISA Kit
4號(hào)染色體開放閱讀框14抗體2--2,2-二苯乙Porcine β-LPH (β-Lipotropic Hormone) ELISA Kit
X染色體開放閱讀框21抗體2--2,2-二苯乙Porcine FGFR2 (Fibroblast Growth Factor Receptor 2) ELISA Kit
磷化C端結(jié)合蛋白1抗體2--1,3-二-4-Porcine MYC (V-Myc Myelocytomatosis Viral Oncogene Homolog) ELISA Kit