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大額牛肺細胞;BFR-L1
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  大額牛肺細胞;BFR-L1的詳細資料:

細胞名稱  大額牛肺細胞;BFR-L1
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞系來源于一雄性新生大額牛的肺組織。2000年由中國科學院昆明細胞庫建立。

培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)胎牛血清15%

傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次

傳代情況: P3

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 熒光法(-)?

產品名稱

大額牛肺細胞;BFR-L1

生長特性

貼壁生長

貨號

EY-X63777

產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 
培養(yǎng)操作步驟
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
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可溶性CD38檢測試劑盒細胞名稱: 人結腸腺癌細胞;LS180(CL-187)[LS180]形態(tài)特性: 上皮樣soluble CD38

可溶性MHC-I鏈相關基因B檢測試劑盒細胞名稱: 人膀胱移行細胞癌細胞;T24形態(tài)特性: 上皮樣soluble major histocompatibility complex class I chain-related gene B

可溶性OX40配體檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠正常肝細胞;NCTC1469[NCTC1469]形態(tài)特性: 上皮樣solution OX40 Ligand

可溶性sCD146分子檢測試劑盒細胞名稱: 人舌鱗癌細胞;Tca-8113[Tca8113]形態(tài)特性: 上皮樣sCD146

可溶性Toll樣受體6檢測試劑盒細胞名稱: 正常小鼠Leydig細胞;TM3形態(tài)特性: 上皮樣soluble Toll-like receptor 6

可溶性白介素2受體檢測試劑盒細胞名稱: 正常小鼠Sertoli細胞;TM4形態(tài)特性: 上皮樣soluble interleukin 2 receptor

可溶性白介素7受體檢測試劑盒細胞名稱: 人頸鱗狀細胞癌細胞;SiHa形態(tài)特性: 上皮樣Soluble Interleukin-7 Receptor

可溶性白細胞分化抗原14檢測試劑盒細胞名稱: 293來源病包裝細胞;ΦA-GP形態(tài)特性: 上皮樣soluble cluster of differentiation 14

可溶性白細胞介素6檢測試劑盒細胞名稱: 293來源病包裝細胞;ΦA形態(tài)特性: 上皮樣soluble Interleukin 6

可溶性白細胞抗原G檢測試劑盒細胞名稱: 615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7712形態(tài)特性: 腹水型sHLA-G

可溶性白細胞抗原-I檢測試劑盒細胞名稱: 615小鼠癌瘤株;Ca759形態(tài)特性: 實體瘤sHLA-I

可溶性補體受體1檢測試劑盒細胞名稱: 615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755形態(tài)特性: 實體瘤soluble Complement receptor type1

可溶性蛋白185檢測試劑盒細胞名稱: 615小鼠癌瘤株;Ca763形態(tài)特性: 實體瘤soluble protein 185

可溶性肝X受體檢測試劑盒細胞名稱: 615小鼠肺癌瘤株;HP615形態(tài)特性: 實體瘤soluble Liver X Receptor

可溶性共刺激分子4檢測試劑盒細胞名稱: 615小鼠癌瘤株;Ca761形態(tài)特性: 實體瘤sCTLA-4

可溶性胸苷激酶1檢測試劑盒細胞名稱: 615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7912形態(tài)特性: 腹水型Thymidine Kinase 1, Soluble

可溶性血管內皮細胞生長因子受體1檢測試劑盒細胞名稱: 615小鼠狀肺腺癌瘤株;P615形態(tài)特性: 實體瘤Soluble Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1
大額牛肺細胞;BFR-L1沙氏葡萄糖肉湯(SDB)規(guī)格:250g用途:用于藥品或生物制品中真菌的培養(yǎng)

李氏菌增菌肉湯(LB1)規(guī)格:9ml*20支/包用途:用于李氏菌二步增菌

動力-硝鹽培養(yǎng)基(B法)規(guī)格:250g用途:用于產氣莢膜梭菌的動力和硝鹽還原試驗

玉米瓊脂對照培養(yǎng)基規(guī)格:5.1g/300ml/袋用途:培養(yǎng)基適用性實驗

酵母浸粉規(guī)格:250g用途:培養(yǎng)基原材料,提供細菌生長所需的族

大腸桿菌生化鑒定條(GB)規(guī)格:4種*2*5條用途:用于大腸桿菌的生化鑒定

產品相關關鍵字: 大額牛肺細胞 BFR-L1
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