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產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
兔痘病毒探針法PCR熒光定量試劑盒 | Rabbit Pox Virus(RPV) | EY00P9291 |
產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對,定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測等
實(shí)驗(yàn)報告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報告
硬脂酸(98%)苯并[e]芘 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human ECEL1 ELISA Kit
牛蒡苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)戊酸丁酯 ≥98.0 %Human ECHS1 ELISA Kit
牛蒡苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)3-溴基叔丁基二甲基硅 97%Human EEF1G ELISA Kit
牛蒡子苷(標(biāo)準(zhǔn)品)抗氧劑618 試劑級Human ECH1 ELISA Kit
日當(dāng)藥黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)1,3-丁二烯溶液 20 wt. % in tolueneHuman DR3 ELISA Kit
?;悄懰徕c(標(biāo)準(zhǔn)品)硅酸鈣 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human ECM2 ELISA Kit
?;悄懰徕c氯苯靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%Human DTX3L(E3 ubiquitin-protein ligase DTX3L) ELISA Kit
?;悄懰徕c氯苯靈 98%Human E2F4 ELISA Kit
?;悄懰徕c野百合堿 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human EDAR ELISA Kit
諾米林(標(biāo)準(zhǔn)品)環(huán)戊烷 99%(GC)Human EDC3 ELISA Kit
歐當(dāng)歸內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品)4-氯-3-酚 99%Human EDC4 ELISA Kit
歐前胡素(標(biāo)準(zhǔn)品)膽固 99%Human E2F7 ELISA Kit
α-蒎烯3-氯酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human E2F8 ELISA Kit
β-蒎烯(標(biāo)準(zhǔn)品)皮質(zhì)甾酮 98%Human DNAJC2/MPP11 ELISA Kit
七葉膽苷XVII(標(biāo)準(zhǔn)品)硫化亞銅 99%Human DAPK1 ELISA Kit
兔痘病毒探針法PCR熒光定量試劑盒Ki-67蛋白(Ki67P)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)6 x Ficoll Loading Dye EB 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
雙特異性磷酸酶5(DUSP5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)6 x Ficoll Loading Dye II (Xylene cyanol & BPB) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
鈣結(jié)合蛋白(CALB)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)6 x Glycerol Gel Loading Buffer without Dye 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
雙糖鏈蛋白聚糖(BGN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)6 x Glycerol Gel Loading Dye Orange (Xylene cyanol & Orange G) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
神經(jīng)源性蛋白酶抑制劑(NSP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)6 x Glycerol Gel Loading Dye SDS (Xylene cyanol & BPB) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
70kDa熱休克蛋白結(jié)合蛋白1(HSPBP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)6 x Sucrose Gel Loading Buffer without Dye 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
多型性腺瘤基因樣蛋白1(PLAGL1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)6 x Sucrose Gel Loading Dye III (Xylene cyanol & BPB & Orange G) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
雙特異性磷酸酶1(DUSP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)6-溴-2-萘酚(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:GC≥98%,進(jìn)口分裝