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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>>狗肺成纖維樣細(xì)胞;DogL1
 
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產(chǎn)品名稱:
狗肺成纖維樣細(xì)胞;DogL1
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產(chǎn)品報價:
產(chǎn)品特點:
狗肺成纖維樣細(xì)胞;DogL1相關(guān)產(chǎn)品:
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  狗肺成纖維樣細(xì)胞;DogL1的詳細(xì)資料:

公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號

狗肺成纖維樣細(xì)胞;DogL1

貼壁生長

EY-X63789

細(xì)胞名稱  狗肺成纖維樣細(xì)胞;DogL1
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細(xì)胞系來源于一雄性家狗的肺組織。1990年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。

培養(yǎng)條件: McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)15%NBS

傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次

傳代情況: P5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 熒光法(-)
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
血小板相關(guān)抗體IgM檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-Swissalbino形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞Platelet associated antibody

血小板衍生生長因子α受體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Platelet-Derived Growth Factor PDGF-α Receptor

血小板衍生生長因子受體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞;A-9形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞Platelet-Derived Growth Factor Receptor

血小板源性生長因子D檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;PA317形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞Platelet-Derived Growth Factor-D

單核苷轉(zhuǎn)移酶3檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929[L929]形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Nicotinamide mononucleotide adenylyltransferase 3

氧化高密度脂蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠B淋巴細(xì)胞;WEHI231形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞oxidized high density lipoprotein

Ⅱ檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14;MC3T3-E1Subclone14形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞Trypsinogen-2

胰島素樣生長因子2受體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠顱蓋成纖維細(xì)胞;OP9形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞Insulin-like growth factor 2 Receptor

胰島素樣生長因子4檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠胚胎干細(xì)胞;ES-D3(CRL-1934)形態(tài)特性: 球形克隆Insulin-like growth factor 4

胰島素樣生長因子-Ⅰ受體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞;Y1形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Insulin-like growth factor I Receptor

胰羧肽酶B2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;C3H/10T1/2,Clone8形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞Carboxypeptidase B2

胰腺衍生因子檢測試劑盒細(xì)胞名稱: SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣PANDER

乙酰膽酯酶抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 牛胚氣管細(xì)胞;EBTr(NBL-4)形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞Acetylcholinesterase antibody

乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞hepatitis B virus X interacting protein

乙型肝炎病X抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 牛腎細(xì)胞;MDBK形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞HBxAb

乙型肝炎病前S1抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: EB病轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細(xì)胞;B95-8形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣HBV preS1Ab

乙型肝炎病前S2抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞HBV preS2Ab
狗肺成纖維樣細(xì)胞;DogL1無菌取樣袋(帶鐵絲)(30cm*18cm)規(guī)格:50個/包*4用途:用于樣品的取樣采集。

改良frey氏培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于培養(yǎng)滑液支原體及其他禽支原體用。

玉米瓊脂對照培養(yǎng)基規(guī)格:5.1g/300ml/袋用途:培養(yǎng)基適用性實驗

鞭毛染色液拉丁屬名:鞭毛染色液用途:用于細(xì)菌鞭毛染色。

SSDC培養(yǎng)基(ISO)規(guī)格:250g用途:用于小腸結(jié)腸耶爾森氏菌的分離培養(yǎng)

WS 瓊脂規(guī)格:250g用途:用于沙門氏菌的選擇性分離(GB標(biāo)準(zhǔn))
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 狗肺成纖維樣細(xì)胞 DogL1
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