公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
家貓肺細胞;FCA-L1 | 貼壁生長 | EY-X63761 |
細胞名稱 家貓肺細胞;FCA-L1
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一雄性家貓的肺組織。1989年由中國科學院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P2
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
B7同源體1檢測試劑盒細胞名稱: 人成骨肉瘤細胞;Saos-2形態(tài)特性: 上皮樣;多角形B7-H1
B7同源體2檢測試劑盒細胞名稱: 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12[PC12]形態(tài)特性: 多角形B7-H2
B7同源體3檢測試劑盒細胞名稱: 人骨肉瘤細胞;U-2OS[U2OS;U2-OS;U-2OS]形態(tài)特性: 上皮樣B7-H3
Bmi-1基因檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠T淋巴細胞瘤細胞;Cyc-Tag(S49)形態(tài)特性: 圓形B cell-specific MLV inte-gration site-1
Brevican檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠骨髓細胞;FDC-P1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣;單個或成簇生長Brevican
B類清道夫受體1檢測試劑盒細胞名稱: 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1形態(tài)特性: 上皮樣Scavenger Receptor Class B Member 1
CC趨化因子受體1檢測試劑盒細胞名稱: 人橫紋肌肉瘤細胞;A-204形態(tài)特性: 上皮樣CC-chemokine receptor 1
CC趨化因子受體2檢測試劑盒細胞名稱: 人癌細胞;MDA-MB-231形態(tài)特性: 上皮樣CC-chemokine receptor 2
CD100分子檢測試劑盒細胞名稱: 人導管癌細胞;MDA-MB-435S形態(tài)特性: 上皮樣Cluster of differentiation 100
CD44變體6檢測試劑盒細胞名稱: 人肺腺癌細胞;Calu-3形態(tài)特性: 上皮樣CD44v6
CD蛋白(損壞性關節(jié)炎)檢測試劑盒細胞名稱: SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7形態(tài)特性: 成纖維細胞樣YKL-40
CIP2A檢測試劑盒細胞名稱: 人腎癌Wilms細胞;G401形態(tài)特性: 上皮樣CIP2A
Clara細胞分泌蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人成纖維細胞;HFF形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Clara cell secretion protein
CREB調節(jié)轉錄輔激活因子1檢測試劑盒細胞名稱: 人急性早幼粒白血病細胞;HL-60形態(tài)特性: 髓母細胞樣CREB Regulated Transcription Coactivator 1
CREB調節(jié)轉錄輔激活因子2檢測試劑盒細胞名稱: 人肝癌細胞;HepG2[HepG2]形態(tài)特性: 上皮樣CREB Regulated Transcription Coactivator 2
CXC趨化因子受體1檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細胞(來自NIH3T3);PA12形態(tài)特性: 成纖維細胞樣CXC-chemokine receptor 1
C端聚集蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人骨肉瘤細胞;HOS形態(tài)特性: 上皮樣細胞和成纖維樣細胞均有c-terminal Agrin
家貓肺細胞;FCA-L1蠟樣芽孢桿菌成套生化鑒定管(LYGB)規(guī)格:7種*2套/盒*5盒用途:用于蠟樣芽孢桿菌的生化鑒定。
博檢革蘭氏陰性細菌鑒定系統(tǒng)規(guī)格:5條/盒用途:用于革蘭氏陰性細菌生化鑒定
霉菌、酵母菌快檢紙片規(guī)格:20片/包用途:可用于各類食品、飲料、飲用水衛(wèi)生質量檢測
M-腸道菌瓊脂規(guī)格:250g用途:用于水中或其它物質中腸球菌分離培養(yǎng)和計數(shù)(濾膜法或劃線法)
甲醛快速檢測試劑盒拉丁屬名:食物種類: 水發(fā)產品、固體食品等
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于霉菌、酵母菌計數(shù)
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。