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產(chǎn)品名稱 | 胚肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;SL-1 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63709 |
細(xì)胞名稱 胚肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;SL-1
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。
Vasicine
CAS No.:6159-55-3
中文名:鴨嘴花
分子式:C11H12N2O
;Artemisinic acid 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13) 規(guī)格: 20mg
秋水仙;Colchicine 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13) 規(guī)格: 20mg
?;?/font>;Taurine 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13) 規(guī)格: 20mg
毛兩面針?biāo)?/font>;toddalolactone 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶14(MMP14) 規(guī)格: 20mg
素;Tripdiolide 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶14(MMP14) 規(guī)格: 20mg
羅丹明B;Rhodamine B 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15) 規(guī)格: 20mg
款冬;Tussilagone 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15) 規(guī)格: 20mg
N基野靛;Caulophyllin 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15) 規(guī)格: 20mg
華基;Cibufagin 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶16(MMP16) 規(guī)格: 20mg
虎杖苷;Polydatin 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶16(MMP16) 規(guī)格: 20mg
L谷;LGlutamic aci 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶17(MMP17) 規(guī)格: 100mg
扶桑甾;betarosasterol 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶19(MMP19) 規(guī)格: 10mg
大豆異黃 ;Isoflavone 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶19(MMP19) 規(guī)格: 20mg
對羥基桂;pHydroxycin 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2) 規(guī)格: 20mg
草;Oxalic acid 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2) 規(guī)格: 100mg
草質(zhì)素;Herbacetin 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2) 規(guī)格: 20mg
八氫姜黃素;octahydrocurcu 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2) 規(guī)格: 20mg
百蕊草素I;Kaempeerol3O 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2) 規(guī)格: 20mg
EphB1/Eph receptor B1 酪蛋白激酶受體B1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Lercanidipine HCl
phosphoEphB1/Eph receptor B1(Tyr317) 酪蛋白激酶受體B1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Lercanidipine HCl
phosphoEphB1/Eph receptor B1(Tyr331) 酪蛋白激酶受體B1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Promethazine Hydrochloride
Kidins220 220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Agomelatine
phosphoKidins220 (Ser918) 220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Agomelatine
ELF1/E74 like factor 1 轉(zhuǎn)錄因子ELF1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Piracetam
Ephrin B3 酪蛋白激酶B3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ramelteon
EphB1+EphB2 酪蛋白激酶受體B1+B2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Lacosamide
戊五 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Xylitol 含量:高純,98%
芴甲 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:9Fluorenylmethanol 含量:AR,98%
芴甲羰基D脯 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:FmocDProOH 含量:特純,99%
芴甲羰基D纈 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:FmocDValOH 含量:特純,99%
芴甲羰基L谷5叔丁酯 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:FmocGlu(OtBu)OH 含量:BR,98%
芴甲羰基L纈 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:FmocLvaline 含量:BR,99%
芴,亞聯(lián)基甲 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:9Fluorenone 含量:BR,98%
西黃蓍膠粉 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Gumtragacanthpowder 含量:GR,99.5%
進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Rapamycin 含量:BR,85%
西瑪嗪 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Simazine 含量:高純,100mM
胚肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;SL-1固體培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于細(xì)菌、纖維分解菌、真菌計數(shù)培養(yǎng)
四硫磺鹽煌綠增菌液基礎(chǔ)(TTB)顆粒規(guī)格:250g用途:用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
MS培養(yǎng)基(含瓊脂,不含蔗糖)規(guī)格:250g用途:用于植物組織培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
葡萄糖(腦膜炎奈瑟氏菌)規(guī)格:20ml/支詳情介紹
GN增菌液(10ml)規(guī)格:10ml*20用途:主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng),亦可用于沙門氏菌增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
酪蛋白胨大豆吐溫20培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于藥品(含防腐劑)的中和劑