產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,使每個(gè)循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測(cè)探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
葡萄狀穗霉屬通用探針法PCR熒光定量試劑盒 | Stachybotrys spp. | EY00P9362 |
運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對(duì),定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品,設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL陽性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管,其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照(用水做模板),6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1個(gè)用于PCR陽性對(duì)照(用第4號(hào)管的陽性對(duì)照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
雜質(zhì)Ⅰ/4-[2-(3-乙基-4-甲基-2-氧-3-吡咯啉-1-甲酰基)乙基]苯磺酰甲酸乙酯(標(biāo)準(zhǔn)品)4-二乙氨基苯甲 98%Human CNTNAP2(Contactin Associated Protein Like Protein 2) ELISA Kit
(標(biāo)準(zhǔn)品)鄰 99%Human CNTN4(Contactin 4) ELISA Kit
(標(biāo)準(zhǔn)品)對(duì) CP,98%Human CNX(Calnexin) ELISA Kit
美他多辛(標(biāo)準(zhǔn)品)硒粉 99.9% metals basis,200目Human COL11α1(Collagen Type XI Alpha 1) ELISA Kit
D-焦(標(biāo)準(zhǔn)品)二異丁基氫化鋁 1.0 M in hexanesHuman COL13(Collagen Type XIII) ELISA Kit
拖拉塞米雜質(zhì)A(4-(3-氨基)-3-吡啶磺酰(標(biāo)準(zhǔn)品)*基鋁 2.0 M 甲苯溶液Human COL2(Collagen Type Ⅱ) ELISA Kit
3-吲哚甲酸(標(biāo)準(zhǔn)品)二苯 97%Human COL3(Collagen Type Ⅲ) ELISA Kit
異鼠李素-3-O-槐二糖-7-O-鼠李糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)2-氯乙鹽酸鹽 98%Human c-myc(c-myc Oncogene Product) ELISA Kit
(-)-Holostyligone甲氧基鹽酸鹽 98%Human COL4(Collagen Type IV) ELISA Kit
二乙酰氨乙酸乙二(標(biāo)準(zhǔn)品)甜菜堿,無水 98%Human CMLC-1(Cardiac Myosin Light Chains 1) ELISA Kit
鹽酸雜質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)品)甜菜堿,一水 99%Human CNR1(Cannabinoid Receptor 1, Brain) ELISA Kit
5-羧基-X-羅丹明甜菜堿鹽酸鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%Human CK-13/KRT13(CytokeRatin 13) ELISA Kit
硫氧嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)乙酰酮鈹 97%Human CNTN4(Contactin 4) ELISA Kit
鹽酸塞利洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)乙酰酮鈷(II) 97%Human CK-18/KRT18(CytokeRatin 18) ELISA Kit
十二烷基硫酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)乙酰酮銅 97%Human CK-20/KRT20(CytokeRatin 20) ELISA Kit
葡萄狀穗霉屬通用探針法PCR熒光定量試劑盒自噬/芐氯素1調(diào)節(jié)因子1(AMBRA1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)異辛烷(色譜級(jí)) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
水通道蛋白10(AQP10)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)異辛烷(色譜級(jí)) 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
水通道蛋白11(AQP11)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)異(色譜級(jí)) 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
水通道蛋白12(AQP12)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)異(色譜級(jí)) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
Megane蛋白(Mgn)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)異(色譜級(jí)) 質(zhì)量規(guī)格:鑒別
TLX1鄰位子(TLX1NB)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)異(色譜級(jí)) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
Synleurin蛋白(SLRN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)異(色譜級(jí)) 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
紡錘體蛋白2B(SPIN2B)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)異(色譜級(jí)) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,血小板生成素受體激動(dòng)劑