產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
細(xì)胞名稱 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞;DCS
形態(tài)特性: 梭形,胞突呈分枝狀,常有大小粗細(xì)不等的胞突
生長特性: 貼壁生長
特征特性: LⅡ瘤株在615小鼠皮下移植后,取脾臟原代培養(yǎng),傳20代后鑒定:細(xì)胞呈多角形、梭形及不規(guī)則形,胞突呈分枝狀,常有大小粗細(xì)不等的胞突;經(jīng)鑒定證明是小鼠樹突狀肉瘤細(xì)胞;615小鼠皮下移植成瘤。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%CS
傳代方法: 1:3~1:6傳代;2~3天1次。
傳代情況: P22
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)?
產(chǎn)品名稱 | 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞;DCS |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63303 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,產(chǎn)品名稱貨期短,價格優(yōu),售后齊全。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
抗NADH脫氫酶亞單位1單抗雜交瘤細(xì)胞;LP-NADH-F11形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-CD81 Polyclonal Antibody
抗人Nigo單抗雜交瘤細(xì)胞;IF4G7-NOGO形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-GLP1R Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細(xì)胞;IIID12-G7形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-ITGA7 Polyclonal Antibody
抗人ORM1-like2單抗雜交瘤細(xì)胞;ⅠE3-A10形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-MyoD1/Myf3 Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細(xì)胞;1D9形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-HIF1A Polyclonal Antibody
抗人微管a蛋白單抗雜交瘤細(xì)胞;2C10D7B5B2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-Asymmetric DiMethyl-Histone H3-R2 Polyclonal Antibody
抗人BCS1-like小鼠雜交瘤細(xì)胞;1C3C12A2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗兔IgG
抗人fusion單抗雜交瘤細(xì)胞;1F4E6A2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-CD14 Polyclonal Antibody
抗人磷脂酰肌醇蛋白聚糖前體蛋白單抗雜交瘤細(xì)胞;3A11C7H4D5形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-CD47 Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細(xì)胞;IIIF9形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-SAFB Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細(xì)胞;2G9B9H6A2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-FTH1 Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細(xì)胞;2D6C1C2C5形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-SEMA7A Polyclonal Antibody
抗人TATAbox結(jié)合蛋白反應(yīng)蛋白單抗雜交瘤細(xì)胞;1E2D6形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-THAP1 Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細(xì)胞;IIB11形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-IDH2 Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細(xì)胞;D7C5E2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-NRAS Polyclonal Antibody
小鼠雜交瘤細(xì)胞;IF4B7形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-PFDN2 Polyclonal Antibody
小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞;DCS大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒CRHELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒CRHELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒CRHELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒CRPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒CRPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒CRPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒CRPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒CRPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。