綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強,培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
羅伊氏短芽孢桿菌規(guī)格 | Brevibacil | EY-J963530 |
資源名稱: 羅伊氏短芽孢桿菌
種屬: Brevibacillus reuszeri
提供形式: 凍干物
安全等級: 1
模式菌株: yes
應用領域: 模式菌株
培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。
生長條件: 30℃,好氧
生長特性: 革蘭氏陽性細菌,形成芽孢。
存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
Calvatia│cyathiformis 中文名稱:杯形禿馬勃Calvatia│cyathiformis提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:藥用培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法 純度:≥98%
Ganoderma│nus 中文名稱:密紋靈芝Ganoderma│nus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:藥用、培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法 純度:豐度:99atom%;化學純度:≥98.5%
Tricholoma│matsutake 中文名稱:松口蘑(松茸)Tricholoma│matsutake提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應用領域:與赤松、黑松、高山松等形成外生菌根,食用,共生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法 純度:豐度:99atom%;化學純度:≥98.5%
Coriolopsis│sanguinaria 中文名稱:血紅擬革蓋菌Coriolopsis│sanguinaria提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法 純度:98%
Ganoderma│capense 中文名稱:薄樹靈芝Ganoderma│capense提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法 純度:98%
Ganoderma│neo-japonicum 中文名稱:新日本靈芝Ganoderma│neo-japonicum提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法 純度:97%
Coriolopsis│gallica 中文名稱:擬革蓋菌Coriolopsis│gallica提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法 純度:98%
Paxillus│involutus 中文名稱:卷邊網(wǎng)褶菌Paxillus│involutus提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法 純度:98%
羅伊氏短芽孢桿菌規(guī)格FLAG Tag(CT) FLAG Tag標簽抗體(C端)山綠茶9,9-二甲基氧雜蒽Human REG3α (Regenerating Islet Derived Protein 3 Alpha) ELISA Kit
Gst P1/GST class-pi 硫轉移酶pi基因抗體廣金錢草1--3-(氧基)苯Human Cyr61 (Cysteine Rich Protein, Angiogenic Inducer 61) ELISA Kit
T7 tag T7 tag標簽抗體大黃(掌葉大黃)1--3-(氧基)苯Human SPARC (Secreted Protein Acidic And Rich In Cysteine) ELISA Kit
V5 tag V5 tag標簽抗體沒藥(膠質沒藥)1,6-雙(二苯基膦基)己烷Human LRG1 (Leucine Rich Alpha-2-Glycoprotein 1) ELISA Kit
KT3 tag KT3 tag抗體青風藤1,6-雙(二苯基膦基)己烷Human REG3γ (Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma) ELISA Kit
VSV-G tag VSV-G tag標簽抗體1,6-雙(二苯基膦基)己烷Human S100A8 (S100 Calcium Binding Protein A8) ELISA Kit
HIV gp120 艾滋病病抗體丁香葉辛Human S100A9 (S100 Calcium Binding Protein A9) ELISA Kit
HIV gp41 艾滋病病抗體薏苡仁辛Human GPR37 (G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit