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產(chǎn)品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發(fā)的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
D-萊苞迪甙A(標準品) Neuropeptide Y (2-36) (human,rat)
D-萊苞迪甙C(標準品) Neuropeptide Y (22-36)
D-賴氨酸鹽酸鹽萊苞迪甙D(標準品) Neuropeptide Y (3-36)(porcine)
D-賴氨酸鹽酸鹽萊苞迪苷G Osteocalcin (7-19) (human)
D-蛋氨酸萊菔子(標準品) Osteogenic Growth Peptide
D-蛋氨酸蘭雪醌,白花丹醌,白花丹素(標準品) Osteostatin (human)
索非布韋藍布正(標準品) Osteostatin (1-5) amide(human, bovine, dog, horse,mouse, rabbit, rat)
索非布韋欖香素 Osteostatin amide (human)
索非布韋狼(狼大戟)(標準品) p60 v-src (137-157)
D-鹽酸鹽狼(月腺大戟)(標準品) p60c-src Substrate ILys(Biotin)
D-鹽酸鹽狼乙素(標準品) PACAP-27 (human, mouse,ovine, porcine, rat)
D-苯氨酸叔丁酯鹽酸鹽老鸛草素(標準品) PACAP-27 (6-27) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)
D-苯氨酸叔丁酯鹽酸鹽老鶴草(標準品) PACAP-38 (16-38) (human,chicken, mouse, ovine,porcine, rat)
D-苯氨酸叔丁酯鹽酸鹽老龍皮酸;網(wǎng)脊衣酸 A(標準品) PACAP-Related Peptide (1-29)(rat)
D-老蛇蓮(標準品) Pancreatic Polypeptide,human
多子小瓜蟲探針法PCR熒光定量試劑盒脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)芬苯達唑;苯硫咪唑 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR125mL×4
脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)芬苯達唑;苯硫咪唑(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品125mL×4
脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)氯前列鈉(D型) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR125mL×4
脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)氯前列鈉(D型) 質(zhì)量規(guī)格:0.99125mL×4
脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)氯前列鈉(DL型) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR125mL×4
甲胎蛋白(αFP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)氯前列鈉(DL型) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品125mL×4
甲胎蛋白(αFP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽酸川芎(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR125mL×4
甲胎蛋白(αFP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽酸川芎(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%125mL×4