公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wild | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63654 |
細(xì)胞名稱 犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wild
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞系源自一只雌性英國(guó)可卡犬的腎臟組織,由S.H.MadinandN.B.Darby于1958年建立。該細(xì)胞為角蛋白陽(yáng)性細(xì)胞。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況: C7
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Picrasidine A
CAS No.:82652-20-8
中文名:
分子式:C27H22N4O3
假荊芥屬苷;Nepitrin 訂購(gòu)|咨詢 鈣黏蛋白18(CDH18) 規(guī)格: 20mg
基黃連;Worenine chlor 訂購(gòu)|咨詢 鈣黏蛋白19(CDH19) 規(guī)格: 20mg
紅松內(nèi)酯;Pinusolide 訂購(gòu)|咨詢 鈣黏蛋白20(CDH20) 規(guī)格: 20mg
黃杞苷;Emgelitin 訂購(gòu)|咨詢 鈣黏蛋白22(CDH22) 規(guī)格: 20mg
枸橘苷;Poncirin 訂購(gòu)|咨詢 鈣黏蛋白23(CDH23) 規(guī)格: 20mg
番茄紅素;Lycopene 訂購(gòu)|咨詢 鈣黏蛋白24(CDH24) 規(guī)格: 20mg
冬凌草素;Ponicidin 訂購(gòu)|咨詢 鈣黏蛋白26(CDH26) 規(guī)格: 10mg
大麥芽;Hordenine 訂購(gòu)|咨詢 鈣黏蛋白7(CDH7) 規(guī)格: 20mg
草質(zhì)素苷;Rhodionin;Herba 訂購(gòu)|咨詢 鈣黏蛋白8(CDH8) 規(guī)格: 20mg
長(zhǎng)梗冬青苷;Pedunculoside 訂購(gòu)|咨詢 鈣黏蛋白9(CDH9) 規(guī)格: 20mg
白蠟樹(shù)精;Fraxil 訂購(gòu)|咨詢 /氫交換因子1(NHE1) 規(guī)格: 20mg
L薄荷;LMenthol 訂購(gòu)|咨詢 //鈣交換因子1(NCKX1) 規(guī)格: 20mg
格洛苷C;Angoroside C 訂購(gòu)|咨詢 //鈣交換因子2(NCKX2) 規(guī)格: 20mg
磺間氧;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 訂購(gòu)|咨詢 /離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶α1肽(ATP1α1) 規(guī)格: 0.1g
亞;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 訂購(gòu)|咨詢 /離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶α2肽(ATP1α2) 規(guī)格: 0.1g
撲草凈;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 訂購(gòu)|咨詢 /離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶β1肽(ATP1β1) 規(guī)格: 0.1g
酰草;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 訂購(gòu)|咨詢 /離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶β1肽(ATP1β1) 規(guī)格: 0.1g
草;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 訂購(gòu)|咨詢 /離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶β3肽(ATP1β3) 規(guī)格: 0.1g
DDIT4L DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄樣蛋白4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Oxybutynin HCl
DEAF1/Deformed Epidermal Autoregulatory Factor 1 畸形表皮自調(diào)節(jié)因子1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Oxybutynin HCl
EID3 E1A樣分抑制因子3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Paroxetine HCl
ERCC6L 發(fā)育相關(guān)蛋白ERCC6L抗體(致畸因子) 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Paroxetine HCl
FAM107A 腎細(xì)胞癌下調(diào)蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Piroxicam
FRK/PTK5 胃腸道相關(guān)酪激酶抗體(蛋白酪激酶5) 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Piroxicam
GANP 生發(fā)中心相關(guān)核蛋白MCM3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Posaconazole
GIDRP88 生長(zhǎng)抑制和分相關(guān)蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Posaconazole
櫟精 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Quercetin 含量:BR,99%
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Furazolidone 含量:BR
聯(lián)大茴香 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:3,3'Dimethoxybenzidine 含量:BR,4%
聯(lián)大茴香 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:oDianisidinedihydrochloride 含量:高純,98%
鏈酶親和素 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Streptavidin 含量:生物技術(shù)級(jí),10u/mg
鏈霉菌屬十字孢 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:StaurosporinefromStreptomycessp. 含量:USP級(jí),99%
鏈脲 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Streptozotocin 含量:BR,9600%
鏈球菌纖溶酶 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Streptokinaserecombinant 含量:高純,30u/mg
鏈絲菌蛋白酶 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:PronaseE 含量:BR,300u/mg
兩性 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:AmphotericinB 含量:BR,90%
犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wildPPLO瓊脂規(guī)格:250g用途:用于支原體分離和培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
衛(wèi)矛醇半固體規(guī)格:20支詳情介紹
木糖賴氨脫氧膽鹽瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基規(guī)格:11.0g/200mL,30袋/盒用途:培養(yǎng)基適用性實(shí)驗(yàn)
LG培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于霉菌、酵母菌、耐熱霉菌及細(xì)菌總數(shù)的檢測(cè),可用于PET瓶及無(wú)菌罐裝線的無(wú)菌驗(yàn)證。
亞碲鉀血瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格:250g用途:用于白喉?xiàng)U菌的分離培養(yǎng)
SC瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格:50%卵黃乳液用途:5ml
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。