商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 人原代胰腺星狀原代細(xì)胞 | 貨號 | EY-XY3294 |
英文名稱 | Pancreatic Stellate Cells | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
培養(yǎng)基:人胰腺星狀細(xì)胞專用培養(yǎng)基
傳代比例:傳代建議1:2傳代,1:2傳代是1個T25瓶傳2個T25瓶或2個6cm皿
細(xì)胞基本屬性:
種屬來源:人
組織來源:胰腺
生長特性:貼壁生長
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%胰蛋bai酶
產(chǎn)品貨期:7-8周左右
運(yùn)輸方式:T25培養(yǎng)瓶/順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制:僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹:
人原代胰腺星狀細(xì)胞人胰腺星狀細(xì)胞采用膠原酶制備而來,人胰腺星狀細(xì)胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有胰蛋bai酶原、脂肪酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖;γ細(xì)胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌;PP細(xì)胞分泌胰多肽,抑制胃腸運(yùn)動、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征,活化的胰腺星狀細(xì)胞(PSC)是胰腺纖維化的主要效應(yīng)細(xì)胞,PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴,并表達(dá)Desmin蛋白,活化后的PSC則表達(dá)α-平滑肌肌動蛋白(alpha-SMA)。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種,并分別具有特異的標(biāo)志物。靜息狀態(tài)PSC胞質(zhì)內(nèi)富含的維生素脂滴可以被油紅O染成紅色,陽性表達(dá)Desmin。激活狀態(tài)PSC陽性表達(dá)alpha-SMA。油紅O染色發(fā)現(xiàn),原代分離的細(xì)胞培養(yǎng)6d,胞漿中仍可見明顯的脂滴,傳代后,橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示,細(xì)胞接種24h仍然表達(dá)Desmin,48h后Desmin基本不再表達(dá)。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細(xì)胞開始表達(dá)alpha-SMA,隨著培養(yǎng)時間的增長和傳代次數(shù)的增加,細(xì)胞表達(dá)alpha-SMA,而不再表達(dá)Desmin,說明細(xì)胞活化。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程,至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細(xì)胞激活,傳代后細(xì)胞處于高度激活狀態(tài)。原代胰腺星狀細(xì)胞可作為慢性胰腺炎新藥的細(xì)胞篩選模型,目前研究發(fā)現(xiàn):胰腺受損時,在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細(xì)胞活化,導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)、功能發(fā)生變化,促使基質(zhì)增生、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積。正常胰腺組織中星狀細(xì)胞為靜止?fàn)顟B(tài),靜態(tài)的胰腺星狀細(xì)胞內(nèi)含維生素脂滴和油脂酸,并具有攝取和酯化的功能,但是不具備促纖維化作用。致胰腺損傷的各種刺激因子使胰腺星狀細(xì)胞活化時,其細(xì)胞內(nèi)脂滴消失,轉(zhuǎn)化為成肌纖維細(xì)胞樣的表型細(xì)胞,具有致纖維原性和平滑肌細(xì)胞的特點(diǎn):與細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分如I型、Ⅲ型膠原蛋白、纖維連接蛋白、層粘連蛋白的抗體呈強(qiáng)陽性染色反應(yīng)。提示細(xì)胞外基質(zhì)的大量合成及沉積。此過程近來已經(jīng)在動物模型及慢性胰腺炎患者的胰腺組織中得到證實(shí)。原位雜交顯示纖維化的胰腺中呈僅α-SMA染色陽性的細(xì)胞正是產(chǎn)生膠原的主要來源。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
5.客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何可以咨詢我們在線客服。
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原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞培養(yǎng)有含義、培養(yǎng)過程、培養(yǎng)結(jié)果和應(yīng)用四個方面區(qū)別:
一、含義不同
原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取組織或器官的一部分進(jìn)行培養(yǎng),也稱初代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)是將培養(yǎng)物放置在體外生長環(huán)境中持續(xù)培養(yǎng),中途不分割培養(yǎng)物的培養(yǎng)過程。
傳代培養(yǎng)是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內(nèi),再進(jìn)行培養(yǎng)的過程。
二、培養(yǎng)過程不同
原代培養(yǎng)將動物組織從機(jī)體中取出離散成單個細(xì)胞(常用,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長和繁殖。培養(yǎng)過程相對復(fù)雜,培養(yǎng)條件要求也高,在所有的操作過程中,都必須保持培養(yǎng)物及生長環(huán)境的無菌。
傳代培養(yǎng)是在原代細(xì)胞基礎(chǔ)上通過等物質(zhì)消化后繼續(xù)用于細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)胞,它與原代細(xì)胞具有相同核型。這類細(xì)胞在體外可以無限制分裂。一般普通培養(yǎng)條件下都容易生存,傳代細(xì)胞容易增殖。但也要注意無菌操作并防止細(xì)胞之間的交叉污染,所有操作要盡量靠近酒精燈火焰。每次最好只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。
三、培養(yǎng)結(jié)果不同
原代培養(yǎng)細(xì)胞會分裂。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細(xì)胞的生長就會出現(xiàn)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡。細(xì)胞接種后一般幾小時內(nèi)就能貼壁,并開始生長,如接種的細(xì)胞密度適宜,5天到一周即可形成單層。
傳代培養(yǎng)一般傳到40到50代。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2到4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
四、應(yīng)用不同
原代細(xì)胞培養(yǎng)為研究生物體細(xì)胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。利用此方法還可直接服務(wù)于臨床實(shí)踐。例如,用從手術(shù)中切除的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng),然后用該培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行抗癌藥物的篩選,來幫助選擇化療方案。
傳代培養(yǎng)主要應(yīng)用在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,如口腔醫(yī)學(xué)領(lǐng)域重新構(gòu)建結(jié)構(gòu)復(fù)雜的牙根,還有改良羊水細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),可多次獲得有效地細(xì)胞克隆,大大提高培養(yǎng)成功率,增加了可分析核型數(shù)量,提高了產(chǎn)前診斷工作的質(zhì)量和效益。